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色譜峰大小改變原因

發(fā)布時間: 2015-01-12   人氣指數(shù): 8032


色譜峰形可能會增大也可能會減小,峰面積的減小也就意味著靈敏度的損失,色譜峰大小改變原因有三方面的可能性:進樣問題、重現(xiàn)性問題、部分組分受到影響。

色譜峰形可能會增大也可能會減小,峰面積的減小也就意味著靈敏度的損失,我們從基本方面開始考慮,檢查色譜圖,是所有組分都受到影響,還是只是某些組分。

如果所有色譜峰都發(fā)生了大致相同程度的改變,有三方面的可能性:

1、進樣問題,GC進樣口問題和檢測器問題。檢查并確保進樣針沒有堵塞或泄露,確認進樣設置符合要求,如果使用分流模式進樣還需要檢查分流比,如果使用不分流進樣模式,則檢查吹掃時間和吹掃流量,檢查色譜柱接進樣口和檢測器的端口有無漏氣,確保檢測器所有設置正確,如流量,電壓以及其他檢測器特定的參數(shù)。

如果只是某些組分受影響,看看影響組分是否有相似的揮發(fā)性或官能團,如果只是某些具有特定官能團的組分受影響,系統(tǒng)流路中可能有活性位點,進行進樣口維護不失為一個好辦法,更換襯管,切割色譜柱柱頭,或更換鍍金密封圈。如果響應丟失的組分是高沸點,或低揮發(fā)性的化合物,那可能出現(xiàn)了樣品的岐視。高沸點化合物沒有充分揮發(fā),需要確認進樣口溫度是否正確,你可能需要使用裝有玻璃棉的襯管,或具有更高熱容的襯管,這樣可以提高不易揮發(fā)組分的揮發(fā)性,我們發(fā)現(xiàn)在襯管底部裝填玻璃棉,也可以提高這些組分的揮發(fā)性,如果靈敏度得到恢復,說明在進樣口發(fā)生了樣品岐視,而玻璃棉最大程度地消除了這種歧視。如果是易于揮發(fā)組分的靈敏度發(fā)生了丟失,可能的原因有樣品瓶發(fā)生泄漏,或者樣品制備過程中發(fā)生了改變,注意,進樣針也有可能泄漏。

2、當結(jié)果重現(xiàn)性不好時,該怎么辦,先看樣品瓶密封墊,樣品瓶密封墊的完整性可能受到破壞,使色譜圖發(fā)生改變,當使用同一樣品瓶多次進樣時這個問題尤其突出,如果問題因此出現(xiàn),將樣品瓶墊更換即可解決問題,如果樣品瓶密封墊沒有問題,那就從簡單的進樣口條件開始,確保隔墊沒有出現(xiàn)損壞。如果出現(xiàn)損壞,更換掉。

3、接下來,尤其是當只有部分組分受到影響時,你需要查看載氣流量和溫度設置,同時也要查看檢測器的背景水平,如果噪聲很大,那問題可能出現(xiàn)在系統(tǒng)污染,而不是檢測器,OK,這些就是基本的一些與儀器相關(guān)的原因。

但靈敏度改變也有很多原因。需要檢查分流比,進樣體積和其它進樣口的設置,以確保與原方法設置沒有任何變化,任何改變都可能會顯著影響色譜峰的響應,樣品反吹是造成重現(xiàn)性問題的另一個常見原因,當進樣樣品的蒸發(fā)體積超過襯管體積時,就會發(fā)生反吹,我們也稱之為進樣過量,隨著時間推移,還會導致鬼峰出現(xiàn),可以采取以下幾種方法來防止反吹,減小樣品進樣體積,降低進樣口溫度,如果有可能嘗試脈沖壓力進樣,更換試劑或使用大體積襯管。

色譜柱活性是導致峰大小改變或靈敏度損失的另一個常見原因,如果色譜柱出現(xiàn)活性,而且正好不是在色譜柱頭的位置,無法通過切割色譜柱解決問題,而且色譜柱活性是不可逆的,因而你只有更換掉整根色譜柱了,如果沒有進行進樣口維護,你遲早會遇到色譜問題。

所以,靈敏度或者峰大小的改變可以由很多不同原因造成。從查看譜圖模式和趨勢開始,看是否所有組分峰都受到相同的影響,如果是,那極有可能是進樣口,進樣針或者檢測器出現(xiàn)問題,下一步,如果僅有某些組分受到影響,查看是什么類型的化合物,它們是否是高沸或低沸點的化合物,除此之外,當靈敏度發(fā)生改變時,還需要檢查以下項目:檢查樣品瓶密封塞,進樣口隔墊,檢查檢測器響應和氣體流量,檢查分流比設置,檢查分流開發(fā)時間,如果是手動進樣,保持進樣體積統(tǒng)一,確認樣品濃度,檢查進樣針是否有泄漏,檢查色譜柱污染情況和活性,考慮樣品是否有反吹,通過樣品蒸發(fā)體積公式計算進樣口是否會超載,進行進樣口維護,降低進樣口活性。

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