固定相是色譜柱內不移動的活性物質稱為固定相,是色譜分析中的關鍵,混合組分的分離,主要取決于固定相的選擇。

固定相是色譜柱內不移動的活性物質稱為固定相,是色譜分析中的關鍵,混合組分的分離,主要取決于固定相的選擇。吸收色譜所用的固定相通常為具有吸附活性的物質,如硅膠、氧化鋁、活性炭等。分配色譜中的固定相是涂漬在載體表面上的液體。在這里,惰性物質(載體)單純作為固定相的物理支持物,不屬于固定相的組成部分。

離子交換色譜中的固定相為離子交換劑,排阻色譜中的固定相為凝膠。

固定相的選擇

分離中等極性和極性較強的化合物可選擇極性鍵合相。氰基鍵合相對雙鍵異構體或含雙鍵數不等的環(huán)狀化合物的分離有較好的選擇性。氨基鍵合相具有較強的氫鍵結合能力，對某些多官能團化合物如甾體、強心甙等有較好的分離能力；氨基鍵合相上的氨基能與糖類分子中的羥基產生選擇性相互作用，故被廣泛用于糖類的分析，但它不能用于分離羰基化合物，如甾酮、還原糖等，因為它們之間會發(fā)生反應生成Schiff 堿。二醇基鍵合相適用于分離有機酸、甾體和蛋白質。

分離非極性和極性較弱的化合物可選擇非極性鍵合相。利用特殊的反相色譜技術，例如反相離子抑制技術和反相離子對色譜法等，非極性鍵合相也可用于分離離子型或可離子化的化合物。ODS(octadecyl silane)是應用最為廣泛的非極性鍵合相，它對各種類型的化合物都有很強的適應能力。短鏈烷基鍵合相能用于極性化合物的分離，而苯基鍵合相適用于分離芳香化合物。

另外，美國藥典對色譜法規(guī)定較嚴，它規(guī)定了柱的長度，色譜填料的種類和粒度，色譜填料分類也較詳細，這樣使色譜圖易于重現；而中國藥典僅規(guī)定色譜填料種類，未規(guī)定柱的長度和粒度，這使檢驗人員難于重現實驗，在某些情況下還浪費時間和試劑。

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